fbpx
Wikipedia

High Resoluton Melt

High Resolution Melt (HRM) er en avanceret analyse af smeltekurverne for dobbeltstrenget DNA efter en PCR. Metoden bruges især til at analysere gensekvenser for SNP og mutationer i form af punktmutationer, deletioner og inerstationer i DNA-stykker op til 250 bp.. Metoden er hovedsagelig softwarebaseret, men et PCR-apparatur med mulighed for realtime PCR og en PCR-blok, der kan indstilles i 0,3 graders temperaturintervaller er nødvendig.

Princip

Analysen udføres ved, at man ganske langsomt opvarmer sit dobbeltstrengede DNA fra ca. 50 grader op til 95 grader. Det dobbeltstrengede DNA vil herefter denaturere ved en bestemt temperatur.

Temperaturen, hvor DNA'en denaturerer, er betinget af længden af DNA'en og sammensætningen af baserne adenin, guanin, thymin og cytosin.

Grunden til dette er, at baserne guanin og cytosin kobles sammen ved hjælp af 3 hydrogenbindinger, Dette medfører, at et højere indhold af disse baser i forhold til de to andre, som kun har 2 hydrogenbindinger, vil give en højere smeltetemperatur (temperaturen, hvor DNA denaturerer). Desuden vil en længere DNA-streng være mere holdbar end en kortere.

Dette kan registreres ved at måle fluroscensen af et specielt farvestof, der binder sig imellem DNA-strengene. Når DNA-strengene så går fra hinanden, vil farvestoffet blive frigivet og ophøre med at fluroscere. På den måde kan man måle præcist, ved hvilken temperatur strengene går fra hinanden.

Denne kurve kan så aflæses og sammenlignes med kendte kurver. Her vil man kunne se, om der er tale om en kendt gensekvens, eller om der er mutationer i sekvensen.

High Resoluton Melt
high, resoluton, melt, sprog, overvåg, rediger, high, resolution, melt, avanceret, analyse, smeltekurverne, dobbeltstrenget, efter, metoden, bruges, især, analysere, gensekvenser, mutationer, form, punktmutationer, deletioner, inerstationer, stykker, metoden, . High Resoluton Melt Sprog Overvag Rediger High Resolution Melt HRM er en avanceret analyse af smeltekurverne for dobbeltstrenget DNA efter en PCR Metoden bruges isaer til at analysere gensekvenser for SNP og mutationer i form af punktmutationer deletioner og inerstationer i DNA stykker op til 250 bp Metoden er hovedsagelig softwarebaseret men et PCR apparatur med mulighed for realtime PCR og en PCR blok der kan indstilles i 0 3 graders temperaturintervaller er nodvendig PrincipPrincip RedigerAnalysen udfores ved at man ganske langsomt opvarmer sit dobbeltstrengede DNA fra ca 50 grader op til 95 grader Det dobbeltstrengede DNA vil herefter denaturere ved en bestemt temperatur Temperaturen hvor DNA en denaturerer er betinget af laengden af DNA en og sammensaetningen af baserne adenin guanin thymin og cytosin Grunden til dette er at baserne guanin og cytosin kobles sammen ved hjaelp af 3 hydrogenbindinger Dette medforer at et hojere indhold af disse baser i forhold til de to andre som kun har 2 hydrogenbindinger vil give en hojere smeltetemperatur temperaturen hvor DNA denaturerer Desuden vil en laengere DNA streng vaere mere holdbar end en kortere Dette kan registreres ved at male fluroscensen af et specielt farvestof der binder sig imellem DNA strengene Nar DNA strengene sa gar fra hinanden vil farvestoffet blive frigivet og ophore med at fluroscere Pa den made kan man male praecist ved hvilken temperatur strengene gar fra hinanden Denne kurve kan sa aflaeses og sammenlignes med kendte kurver Her vil man kunne se om der er tale om en kendt gensekvens eller om der er mutationer i sekvensen Hentet fra https da wikipedia org w index php title High Resoluton Melt amp oldid 7915009, wikipedia, wiki, bog, bøger, bibliotek,

artikel

, læs, download, gratis, gratis download, mp3, video, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, billede, musik, sang, film, bog, spil, spil.